sau khi các thành viên trong độ chiga Girls ở Nara một lần đánh bại cường quốc khu vực mahjong Bansei trong trường trung học. Họ cùng nhau đi vào trận bán kết đội tuyển quốc gia nhưng đã để thua nhà vô địch cuối cùng, và các câu lạc bộ mạt chược sau đó đã được giải tán
Mukoujima Takurou một học sinh có sở thích đi câu cá vào những lúc rảnh rỗi, một ngày khi đi câu cậu câu được Muromi một người cá bị bệnh M hết thuốc chữa.
Hinako Nakayama đã trải qua cả cuộc đời mình được nuôi dưỡng trong các trại trẻ mồ côi của nhà nước mà không hề biết gia đình cô. Khi cô ấy bước vào trường trung học, Hinako được tiếp cận bởi Hikaru, một cậu bé tự nhận là người anh em sinh đôi của mình. Theo Hikaru, Hikaru và Hinako là những đứa trẻ của người đứng đầu gia đình Onigashima yakuza hùng mạnh
Kobayakawa Sena là một cậu bé chuyên bị sai vặt lúc còn học tiểu học và trung học. Nhưng mọi thứ đã thay đổi khi cậu bắt đầu nhập học ở trường Deimon, và Hiruma - đội trưởng câu lạc bộ bóng bầu dục đã phát hiện ra khả năng đặc biệt ở cậu rất phù hợp với môn thể thao này. Hiruma đã "nhận" cậu ta vào đội bóng và đặt biệt danh cho cậu là Eyeshield 21 - một runner huyền bí có tốc độ ánh sáng. Và mọi chuyện bắt đầu từ đó.
Aono Hajime đã từng là một thần đồng violin cho đến khi vì một số lý do, cậu trở nên mệt mỏi với việc chơi đàn. Vào năm ba sơ trung, cậu gặp khó khăn trong chuyện định hướng tương lai của mình. Một ngày nọ ở trường, cậu vô tình gặp Akine Ritsuko, cô gái mới tập violin với tính khí nóng nảy vô cùng